目的 建立测定人血清中伏立康唑（voriconazole, VRCZ）浓度的高效液相色谱-紫外检测（HPLC-UV）方法。方法 200μL血清样本采用400μL二氯甲烷萃取，采用HPLC测定，以硝西泮为内标，色谱柱为kromasil（4.6 mm×150 mm, 5μm）,流动相为水-乙腈（体积比60∶40）,流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,进样量20μL,检测波长为254 nm。结果 VRCZ在0.2～16μg·mL-1内线性关系良好（Y=0.073X+0.001 9,r=0.999 2）,定量下限（LLOQ）为0.2μg·mL-1;日内、日间精密度为1.23%～5.51%,准确度为88.5%～102.36%,提取回收率为92.0%～106.5%,RSD＜15%。血清样品在经历3次冻融（-20℃到室温）循环、冷藏放置2周和冷冻放置30 d等条件下均稳定，处理后样品在室温和自动进样器中（4℃）各放置24 h均稳定（RSD＜15%）,VRCZ储备液于-20℃和工作液于4℃放置10个月，内标储备液于-20℃放置1.5个月稳定（RSD＜15%）。测定9个临床样本，范围在0.81～7.96μg·mL-1之间，结论 该法操作简便、灵敏、准确，适用于VRCZ血药浓度的测定。