目的 探讨耐药结节细胞分化（RND）外排泵在耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）中的分布情况及与生物膜形成的作用。方法 收集该院临床分离的CRKP菌株，采用Whonet5.6软件分析其标本来源、科室分布等；采用生物膜形成试验观察不同培养时间生物膜形成情况；采用二代测序数据分析RND外排泵基因、耐药基因、分子分型等；采用PCR扩增RND外排泵基因。结果 63株CRKP中87.3%来源于痰液，77.5%分离自重症监护室（ICU）。二代测序显示，多数菌株携带10余种耐药基因，55.6%菌株耐药基因与表型匹配；携带RND外排泵基因的61株菌株中，PCR扩增阳性23株（37.7%）,荚膜血清型主要为KL64（95.7%）;PCR扩增阴性38株（62.3%）,荚膜血清型较分散，包括KL64（77.5%）、KL47（10.0%）、K50（7.5%）和K20（5.0%）这4种；24 h生物膜阳性31株（49.2%）,36 h生物膜阳性48株（76.2%）;RND阳性与阴性菌株的生物膜形成能力差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 CRKP主要分离自ICU老年患者，多数菌株存在RND外排泵基因但未表达，与生物膜形成无明显相关，其在多重耐药中的作用有待进一步探讨。