资源类型:
收录情况:
◇ 统计源期刊
文章类型:
机构:
[1]首都医科大学宣武医院中心实验室
科技平台
中心实验室
首都医科大学宣武医院
[2]北京脑重大疾病研究院阿尔茨海默病研究所
[3]北京老年医学研究中心
出处:
ISSN:
关键词:
自噬
CRISPR 转录激活
Sirt1
突触素
摘要:
目的 探讨Sirt1对突触囊泡蛋白表达的影响和其在突触前位点的功能。方法 采用CRISPRa技术激活SH-SY5Y细胞内源Sirt1表达,通过转染aSirt1质粒将细胞分为aSirt1#1、aSirt1#2、aSirt1#3、aSirt1#NC组并设置空白对照(Mock)组。采用乳酸脱氢酶检测细胞毒性,通过Western blot检测突触囊泡蛋白及自噬相关蛋白表达水平。结果 a Sirt1#1组和aSirt1#3组细胞毒性低于aSirt1#NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。aSirt1#1组细胞的Sirt1、突触素、囊泡相关膜蛋白2(VAMP2)、α-突触核蛋白(α-Syn)表达水平高于Mock组,差异有统计学意义(P<0.05)。aSirt1#1组SH-SY5Y细胞中自噬相关蛋白Atg13、Becln1表达水平高于Mock组,自噬底物SQSTM1表达水平低于Mock组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。aSirt1#1组SH-SY5Y细胞中P-AMPK/AMPK、P-ULK1/ULK1比值高于Mock组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Sirt1可以通过激活AMPK-ULK1通路的来调节自噬,影响突触囊泡蛋白的表达,有利于突触囊泡循环,影响突触前位点的功能。
基金:
国家重点研发计划(2018YFA0108503,2022YFC2403500)
第一作者:
第一作者机构:
[1]首都医科大学宣武医院中心实验室
通讯作者:
通讯机构:
[1]首都医科大学宣武医院中心实验室
[2]北京脑重大疾病研究院阿尔茨海默病研究所
[3]北京老年医学研究中心
推荐引用方式(GB/T 7714):
何静,王蓉.sirt1对sh-sy5y细胞突触囊泡蛋白表达的影响[J].神经疾病与精神卫生.2024,24(04):243-249.