摘要：
目的 观察富氢水对创伤性脑损伤(TBI)大鼠创伤周围脑组织线粒体损伤及炎症反应的影响.方法 将54只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、创伤组(TBI组)及创伤+富氢水组(TBI+HW组),每组分为伤后1、3、7 d 3个亚组,每个亚组6只.采用改良Feency自由落体撞击法制备TBI大鼠模型;Sham组开颅窗后不予以颅脑撞击.TBI+HW组于制模后立即腹腔注射富氢水5 mL/kg,每日1次,直至处死;Sham组和TBI组均给予等量生理盐水.各组于伤后相应时间点进行神经损伤评分(NSS)后断头处死大鼠,取创伤边缘3 mm内脑组织,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎性因子水平,用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2蛋白表达,用荧光酶标法检测线粒体活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)和线粒体膜通透性转换孔(MPTP).结果 TBI组和TBI+HW组大鼠伤后出现明显神经功能损害,但TBI+HW组伤后3 d和7 d神经功能损害明显轻于TBI组〔NSS(分):9.67±0.82比11.17±1.17, 6.83±0.75比8.50±1.04,均P<0.05〕.与Sham组比较,TBI组和TBI+HW组各时间点脑组织肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、ROS、Bax蛋白表达均明显升高,并于1 d达峰值后逐渐下降;各时间点MMP、MPTP及Bcl-2蛋白表达均明显下降,并于1 d达谷值后逐渐上升.与TBI组比较,TBI+HW组1 d 起TNF-α、IL-1β、ROS、Bax蛋白表达即明显降低〔TNF-α(ng/L):54.14±1.11比81.49±2.76, IL-1β(ng/L):74.53±1.75比119.44±3.56,ROS(RFU):92.30±2.46比121.33±6.57,Bax蛋白表达:0.89±0.01比1.10±0.01,均P<0.01〕,MMP、MPTP和Bcl-2蛋白表达即明显升高〔MMP(RFU):99.28±3.97比74.72±3.00,MPTP(RFU):188.82±4.44比160.01±2.04,Bcl-2蛋白表达:0.52±0.02比0.30±0.02,均P<0.01〕.结论 大鼠TBI早期即有脑组织炎性因子表达增高及线粒体损伤;早期腹腔注射富氢液可减少线粒体损伤和炎性因子释放,减轻TBI后神经细胞凋亡,从而发挥脑保护作用.
