目的：分析四家综合性医院血培养阳性病原菌分布及耐药性变迁，为临床正确选用抗菌药物提供依据。方法收集各医院用Vitek 2 compact、质谱等鉴定仪进行菌种鉴定的血培养阳性分离菌，采用K-B纸片扩散法和仪器法进行药物敏感试验，数据分析采用 WHONET 5.6软件。结果5036株不重复病原菌中革兰阳性菌占53.7%，革兰阴性菌占40.6%，真菌占5.7%。四年中凝固酶阴性葡萄球菌总检出率居首位（32.9%），其次是大肠埃希菌（15.3%）、金黄色葡萄球菌（8.2%）、肺炎克雷伯菌（7.1%）、真菌（5.7%）、屎肠球菌（4.9%）、鲍曼不动杆菌（4.6%）和铜绿假单胞菌（3.6%）。海南省三亚市人民医院金黄色葡萄球菌分离率最高，其次为凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、链球菌属和肺炎克雷伯菌，细菌分布有别于北京的三家医院。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）总检出率分别为58.1%和80.4%，其中三亚人民医院二者检出率最低分别为47.4%和59.9%。屎肠球菌对万古霉素和替考拉宁耐药率分别为8.5%和2.8%，未发现对万古霉素和替考拉宁耐药的粪肠球菌。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs检出率分别为62.6%和50.0%，二者对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为1.4%、0.8%和1.1%、8.6%。铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为45.9%、31.5%和82.5%、79.5%。四年中真菌分离株数明显增加，布鲁杆菌、放射根瘤菌、猪伤寒沙门菌等少见细菌的检出率有增高趋势。结论血培养阳性标本检出病原菌种类及耐药性随地域、时间而不同，血培养标本中真菌和少见细菌分离率上升应引起临床重视并加强血液标本病原菌检测和监测。