摘要:
目的 探讨导痰汤通过对p38丝裂原活化蛋白激酶的调节而干预内皮细胞间黏附分子1(ICAM-1) mRNA的表达,以明确导痰汤治疗动脉粥样硬化的机制.方法 取新生儿脐带,分离脐静脉内皮细胞(HUVEC),传代培养的1-3代用于实验.含药血清的置备:将导痰汤按照0.9g·kg-1·d-1剂量给SD大鼠灌胃后10d,经腹主动脉采血,分离血清.实验共分7组:HUVEC为空白对照组,含药血清(20%)处理HUVEC为导痰汤对照组,肿瘤坏死因子α (TNF-α)预处理HUVEC为TNF-α诱导组,先采用5%,10%,20%含药血清预处理HUVEC,再与TNF-α共培养为5%,10%,20%导痰汤组,使用p38特异性阻滞剂SB203580处理HUVEC为SB203580阻滞组.通过实时定量PCR和Western blot等方法,观察导痰汤对TNF-α刺激脐静脉内皮细胞培养内皮细胞ICAM-1 mRNA的表达和p38表达的影响.结果 ①TNF-α诱导组ICAM-1 mRNA的表达(1.17±0.26)和p38的表达(0.77±0.19)显著高于空白对照组和导痰汤对照组,差异有统计学意义(P<0.01);使用导痰汤含药血清或SB203580处理后,5%导痰汤组ICAM-1 rnRNA的表达为0.97±0.15;10%导痰汤组为0.85±0.17;20%导痰汤组为0.73±0.10; SB203580阻滞组为0.64±0.19;②5%导痰汤组p38的表达为0.69±0.21;10%导痰汤组为0.59±0.27;20%导痰汤组为0.47±0.11;SB203580阻滞组为0.36±0.09,表达显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);p38活性与ICAM-1 mRNA水平呈显著正相关(r=0.706,P<0.01).结论 导痰汤可以通过调节p38表达而抑制TNF-α刺激所致的脐静脉内皮细胞ICAM-1 mRNA的表达,故能起到治疗动脉粥样硬化的作用.