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◇ 统计源期刊
文章类型：
机构：
[1]首都医科大学宣武医院中心实验室神经变性病教育部重点实验室
中心实验室
神经变性病教育部重点实验室
首都医科大学宣武医院
出处：
ISSN：
关键词：
生长相关蛋白-43
多肽合成
抗体制备
摘要：
目的 对生长相关蛋白43(growth associated proteins-43,GAP-43)进行抗原表位分析并制备兔多克隆抗体.方法 通过对GAP-43 cDNA序列及氨基酸序列的结构进行生物信息分析,依据蛋白质的二级结构、亲水性、疏水性、抗原性及理化特性,经过同源性检索后,综合考虑抗体设计的其他因素,选出具有免疫活性的抗原决定簇多肽片段,采用有机固相多肽合成法合成了GAP-43的多肽片段,并与载体蛋白血蓝蛋白(KLH)偶联制备成抗原,免疫新西兰家兔.结果 ELISA测定GAP-43抗体效价为1:32 000;Western blot检测结果显示:在分子量25kDa出现单一条带;免疫组织化学法检测显示:GAP-43蛋白在小鼠海马神经元中有表达;免疫细胞化学法检测显示:GAP-43蛋白在人神经母细胞瘤株SH-SY5Y中存在表达.结论 利用生物信息学软件比较准确地预测GAP-43的抗原决定簇,并成功制备了高效价、高特异性的多肽抗体.
基金：
国家“十一五”863计划“疫苗与抗体工程”(2006AA02A245)； 首都医学发展科研基金(2007-3108)； 北京市卫生系统高层次卫生技术人才计划资助项目(2009-3-64)；
第一作者：
第一作者机构：
[1]首都医科大学宣武医院中心实验室神经变性病教育部重点实验室
通讯作者：
通讯机构：
[1]首都医科大学宣武医院中心实验室神经变性病教育部重点实验室
推荐引用方式(GB/T 7714)：
姬志娟,盛树力,王蓉,等.生长相关蛋白GAP-43多肽抗体的制备[J].中国比较医学杂志.2010,20(8):22-25,后插2.
