摘要：
目的 应用酶法制备猪主动脉脱细胞基质,并评价其生物学性能. 方法 取新鲜屠宰的16根肉猪降主动脉,长10～12 cm,应用0.1%胰蛋白酶和0.01%EDTA于37℃震荡条件下脱除细胞成分,HE和Masson染色行脱细胞基质的组织学观察,扫描电镜和透射电镜观察超微结构改变.应用单轴拉伸方法比较脱细胞前和脱细胞后48、96和120 h时材料两断端厚度、极限抗张强度(ultimate tension stress,UTS)和断裂伸长率(strain of failure,SOF),绘制应力-应变曲线.取成年杂种犬3只,体重20～30 kg,雌雄不限.将脱细胞前后片状主动脉基质埋植于犬脊柱两侧皮下,分别于埋植后1、3和6周取材,行HE染色观察,参照半定量的Wakitani评分法,对取材时的大体形态、浸润细胞种类和数量、新生血管等指标进行比较,观察宿主炎性细胞反应和脱细胞基质变化.将犬内皮细胞种植于猪脱细胞基质,HE染色和扫描电镜观察细胞相容性. 结果 HE染色和电镜检查显示在96h可将新鲜猪主动脉细胞成分脱除,Masson染色显示细胞外纤维成分保留完整.脱细胞前后的动脉基质厚度、UTS和SOF差异均无统计学意义(P＞0.05),但UTS显示降低趋势,SOF则呈现增加趋势,应力-应变曲线呈现力学强度降低和延展性增加的变化趋势.犬皮下埋植,各组脱细胞标本炎性细胞浸润明显减轻,6周时以成纤维细胞浸润为主,且基质中见新生毛细血管.半定量组织学评分,在大体观察、浸润细胞种类和数量方面与脱细胞前比较有统计学意义(P＜0.05);新生血管数量比较,差异无统计学意义(P＞0.05).HE染色和扫描电镜显示种植的内皮细胞可在基质表面形成单细胞层. 结论 应用0.1%胰蛋白酶和0.01%EDTA持续振荡96 h制备的猪主动脉脱细胞基质,在生物力学、免疫原性和细胞相容性方面可满足血管组织工程的需要.
