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α-突触核蛋白寡聚体对多巴胺能神经细胞线粒体膜电位的影响

Effects of α-synuclein oligomers on mitochondrial membrane potential of dopaminergic neural cells

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收录情况: ◇ 统计源期刊

机构: [1]首都医科大学宣武医院老年病研究所神经生物学研究室教育部神经变性病学重点实验室北京100053 [2]首都医科大学宣武医院低氧医学研究所北京100053
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关键词: 突触蛋白类 膜电位 线粒体 神经元 多巴胺

摘要:
目的 体外制备α-突触核蛋白寡聚体,研究其对多巴胺能神经细胞线粒体膜电位的影响.方法 于磷酸盐缓冲液中振荡孵育重组人α-突触核蛋白,应用Western blotting和双抗体夹心酶联免疫吸附测定方法观察α-突触核蛋白寡聚体的形成规律;免疫荧光双重标记法检测α-突触核蛋白单体和寡聚体向经体外培养的MES23.5多巴胺能神经细胞内及线粒体的转运及分布情况;罗丹明法测定α-突触核蛋白寡聚体对线粒体膜电位的影响.结果 α-突触核蛋白在磷酸盐缓冲液中振荡孵育可以形成多种形式的寡聚体(包括二聚体、三聚体、四聚体和十四聚体),形成数量随着振荡孵育时间的延长及α-突触核蛋白单体浓度的升高而增加(均P<0.01).α-突触核蛋白单体和寡聚体可以进入MES23.5多巴胺能神经细胞并进一步转运至线粒体上,二者均可不同程度地降低线粒体膜电位,与空白对照组相比差异有统计学意义(均P=0.000);α-突触核蛋白寡聚体对线粒体膜电位的降低作用较其单体更为明显,二者比较差异有统计学意义(p=0.000).结论 α-突触核蛋白在适当的体外振荡孵育条件下可以形成不同形式的寡聚体,寡聚体进入多巴胺能神经细胞后可明显降低线粒体膜电位.

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第一作者:
第一作者机构: [1]首都医科大学宣武医院老年病研究所神经生物学研究室教育部神经变性病学重点实验室北京100053
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