摘要：
目的 研究β淀粉样肽前体蛋白N端328-332(APP5肽)及其类似物对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响,在体外寻找具有神经营养作用又能抵抗胃蛋白酶消化能力的5肽类似物.方法 合成多个5肽类似物,以MTT代谢率进行筛选,选出最佳的5肽类似物,以人神经母细胞瘤株SY5Y作为体外实验模型,以MTT代谢率、细胞计数,LDH漏出率,Western blotting检测作为观察指标,进一步证实5肽类似物的神经营养作用.应用胃蛋白酶对APP5肽和类似物165进行消化实验,观察两者的酶解率.结果 (1)APP5肽及由此基础上改造的多种类似物均可使SY5Y细胞MTT代谢率增高,而类似物165的效果最好,40 μmol/L为最佳有效浓度.(2)APP5肽及类似物165可使SY5Y细胞MTT代谢率增高,LDH漏出率减少,细胞数量增加,SY5Y细胞P-CREB、Bcl-2蛋白表达增加.(3)胃蛋白酶消化实验显示,胃蛋白酶浓度为40 g/L时,APP5肽和类似物165的酶解率分别为96.4%和16.9%;胃蛋白酶量为100 g/L时,APP5肽和类似物165的酶解率为99.1%和58.6%,两者差异非常显著.5肽类似物165的抗酶解能力明显大于APP5肽.结论 APP5肽及类似物165对SY5Y细胞具有神经营养作用,而APP5肽类似物165具有更强的抗胃蛋白酶消化能力.
