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◇ 统计源期刊
◇ CSCD-C
文章类型：
机构：
[1]首都医科大学宣武医院细胞治疗中心, 北京100053
首都医科大学宣武医院
出处：
ISSN：
关键词：
慢病毒
OTX转录因子
基因表达
摘要：
OTX1基因是神经发育调控中关键转录因子之一.实验构建表达OTX1基因慢病毒载体,探讨慢病毒介导OTX1基因体外过表达的可行性.将OTX1基因克隆到慢病毒穿梭质粒DUET101内,构建表达OTX1以及GFP-OTX1基因的慢病毒载体;将pDUET-OTX1、pDUET-GFP-OTX1及pDUET101(空载体对照)质粒分别与慢病毒包装质粒pCMV△R8.91、pMD.G共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,获得携带OTX1基因、GFP-OTX1基因的重组慢病毒DUET-OTX1、DUET-GFP-OTX1以及仅携带GFP基因的DUET-GFP;用重组慢病毒分别转导293T细胞、SY5Y细胞、小鼠胚胎干细胞及大鼠胚胎15天皮层神经干细胞,证实慢病毒载体能够将外源基因转导入不同细胞,且转导的OTX1或GFP-OTX1在不同细胞中均仅在细胞核内表达;培养OTX1单克隆抗体细胞,浓缩抗体上清,通过Western blot以及细胞免疫荧光法证实慢病毒介导的OTX1基因及GFP-OTX1基因转导入293T细胞后的过表达.证实了慢病毒载体是高效的基因转移载体;OTX1作为发育过程中至关重要的转录因子,经过重组慢病毒体外转导后均只在细胞核内表达.
基金：
国家自然科学基金资助项目(30428010)； 新世纪百千万人才工程资助项目；
第一作者：
第一作者机构：
[1]首都医科大学宣武医院细胞治疗中心, 北京100053
通讯作者：
通讯机构：
[1]首都医科大学宣武医院细胞治疗中心, 北京100053
推荐引用方式(GB/T 7714)：
任萍,王淑艳,关云谦,等.OTX1基因慢病毒载体的构建及过表达研究[J].中国生物工程杂志.2007,27(1):16-21.
