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彗星试验——一种DNA损伤水平与修复能力的测定方法

An important method to comment on DNA damage and DNA repair ability:Comet assay

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收录情况: ◇ 北大核心 ◇ 中华系列

机构: [1]首都医科大学宣武医院检验科 [2]北京大学衰老研究中心 [3]首都医科大学宣武医院心胸血管外科
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关键词: 彗星试验 淋巴细胞

摘要:
目的 介绍彗星试验(Comet assay)方法,并运用其分析人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)及外周血淋巴细胞(Lymphocytes)DNA损伤水平与修复能力.方法 将2BS或淋巴细胞悬液与1%低熔点琼脂糖(LMA)等体积混合,铺于0.5%正常熔点琼脂糖(NMA)胶面上,细胞经充分裂解、电泳、PI染色后,用Leica图象分析系统每样本分析100个细胞彗距和彗尾面积.结果 多数年轻与老龄2BS细胞、年轻与老龄人群淋巴细胞均无明显彗尾.28PD 2BS经H2O2损伤后彗尾明显,且彗距与彗尾面积随H2O2浓度升高而增大.批间(n=6)重复性实验显示,H2O2处理后细胞彗距s=1.7~3.5(μm)、CV=1.6%~2.8%,彗尾面积百分率s=1.5%~2.3%、CV=1.8%~2.5%.结论 年轻与老龄细胞DNA单链断裂水平均较低.H2O2可明显损伤DNA,其损伤水平随H2O2浓度升高而加大,彗星试验是评价DNA损伤水平与修复能力的较好方法.

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第一作者机构: [1]首都医科大学宣武医院检验科
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资源点击量:16409 今日访问量:0 总访问量:869 更新日期:2025-01-01 建议使用谷歌、火狐浏览器 常见问题

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