摘要：
目的:分析淀粉样β蛋白前体蛋白N端328-332对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响,在体外寻找具有神经营养作用、促进神经细胞生长的最适浓度,为进一步细胞损伤的保护及药物体内研究提供理论依据.方法:细胞分组:根据实验目的不同,分组处理如下:第一步分为对照组、短肽N328-332 2.5,5,10,20,40,80,160 μmol/L组.第二步分为对照组、短肽N328-332 40μmol/L组.以MTT代谢率测定细胞存活率以筛选肽对神经细胞生长促进的最佳有效浓度.以MTT代谢率测定细胞存活率、细胞计数观察细胞增长情况、乳酸脱氢酶漏出率观察细胞死亡率和Western Blotting检测P-CREB、Bcl-2表达水平为观察指标,分析短肽N328-332对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响.结果:①从10μmol/L起,短肽N328-332即对SY5Y细胞生长有促进作用,其最小有效浓度为20μmol/L,40 μmol/L促进作用最强,80μmol/L开始作用减弱,故选用40μmol/L浓度作为以下试验浓度.②短肽N328-332 40 μmol/L加药组代表细胞存话率的A值高于对照组,组间比较差异有显著性意义(0.974 1±0.004 7,0.600 1±0.001 9,P＜0.01.③短肽N328-33240μmmol/L加药组乳酸脱氢酶漏出率明显低于对照组,组间比较差异有显著性意义(84.913 5±31.575 9,199.625 2±40.7273,P＜0.01.④从接种第4天始,短肽N328-332组SY5Y细胞数增加,与对照组相比,差异有显著性意义(P＜0.05).⑤短肽N328-332 40μmol/L组P-CREB、Bcl-2蛋白表达高于对照组(37 424.08±83.59,34 957.24±78.03,19 110.24±45.80,2 761.36±58.61,P＜0.05).结论:短肽N328-332对SY5Y细胞具有神经营养作用,40 μmol/L浓度,效果优于其他浓度.
