摘要:
目的探讨早期炎性反应对移植静脉中腺病毒载体转染的外源基因表达效率的影响.方法通过颈外静脉将携lacZ基因的腺病毒载体注入大鼠的颈总静脉中,使其自然充盈.室温下孵育30min后,将转基因静脉间置移植于颈总动脉.在静脉转基因后3,14,21 d取材.经X-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-D-半乳糖苷)染色检测静脉中标记基因的表达,测定β-半乳糖酶的活性.常规免疫组化染色观察静脉中细胞内黏附分子-1(ICAM-1)及血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达.结果外源基因在体表达14d时β-半乳糖酶活性下降,至21 d时活性近消失.静脉移植后3 d,VCAM-1和ICAM-1表达上调,白细胞浸润,内皮细胞脱落,内皮层不完整.而未进行移植的转基因静脉,内皮细胞无VCAM-1及ICAM-1的表达,血管壁无炎性细胞浸润,内皮细胞完整.在移植静脉中,阳性内皮细胞数比未移植静脉明显减少(P<0.05),平滑肌细胞数则与未移植静脉相比无明显差别.结论移植静脉早期炎性反应造成的内皮细胞损伤与转基因表达迅速下降有关.