摘要:
目的载脂蛋白E(apoE)是血浆中参与脂质代谢的重要蛋白质,并且与迟发型早老性痴呆(AD)相关.为从整体水平研究人突变ApoE基因剂量与效应的关系,我们拟培育C57BL/6-hApoE7纯合子转基因小鼠.方法将经Southern杂交鉴定为阳性的F1代小鼠进行互配,仔代经PCR初筛,再行Southern杂交鉴定,杂交结果经扫描定量分析以确定hApoE7基因整合的拷贝数,纯合子小鼠的拷贝数为杂合子的两倍.经此法鉴定的纯合子小鼠与正常C57BL/6小鼠进行侧交以进行进一步的鉴定.结果 Southem杂交鉴定出F1代转基因小鼠6只,F2代转基因小鼠7只,其中纯合子3只.将所得到的纯合子小鼠与正常的C57BL/6小鼠交配,仔代鼠经PCR鉴定结果全部为阳性.结论通过培育C57BL/6-hApoE7纯合子转基因小鼠,发现人ApoE7基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传,转基因的遗传特征符合常染色体单位点整合.