摘要：
目的研究影响人α-突触核蛋白(α -synuclein)基因在原核细胞中表达的常见因素,以提高其在原核细胞中的表达量. 方法将重组质粒ProEXNACP转化进入到DH5α-大肠杆菌体内,观察诱导剂IPTG浓度、诱导时间、诱导温度、诱导培养基、诱导初始菌浓度及诱导中pH值变化等因素对蛋白表达产量的影响,用SDS-PAGE梯度胶电泳分析,考马斯亮蓝染色进行比较研究, 同时检测pH值,观察其变化. 结果诱导剂IPTG浓度对诱导蛋白产生的影响不大,诱导过程中pH值变化较小,而诱导时间、温度、初始菌浓度和培养基的种类对诱导产生α-突触核蛋白有较大影响.其中,以LB培养基,37℃,180 r/min诱导1～2 h产生α-突触核蛋白的量最大 . 结论诱导剂IPTG诱导ProEXNACP/DH5α大肠杆菌产生α-突触核蛋白的量与诱导时间、温度、初始菌浓度和培养基的种类有明显的关系.初始菌A590 =0.5～0.8,LB培养基,37℃,大通氧量(180 r/min以上),1～2 h诱导可作为大量提取、纯化α-突触核蛋白的首选条件.
