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◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
文章类型：
机构：
[1]首都医科大学北京市神经外科研究所病理生理学室北京100050
研究所
北京市神经外科研究所
首都医科大学
首都医科大学附属天坛医院
[2]北德克萨斯大学健康科学中心药理学与神经科学系德克萨斯州76107
出处：
ISSN：
关键词：
星形胶质细胞
水通道蛋白4
siRNA转染
RNAiMAX
基因沉默
实时定量聚合酶链反应
大鼠
摘要：
目的 明确脂质体RNAiMAX(lipofectamine RNAiMAX)是否可以介导小干扰RNA(siRNA)转染入原代培养星形胶质细胞并实现水通道蛋白4(AQP4)基因沉默.方法 利用原代培养的Wistar大鼠大脑皮层星形胶质细胞,通过倒置荧光显微镜和Tecan酶标仪,观察lipofectamine RNAiMAX是否能介导Cy3标记的siRNA转染入细胞内,以及RNAiMAX浓度和siRNA浓度对转染效率的影响;利用Real-time PCR方法检测AQP4 siRNA转染的基因沉默效果.结果 倒置荧光显微镜和Tecan酶标仪检测发现,随着siRNA和RNAiMAX浓度的增加,转染细胞荧光强度随之增加(n=6);Real-time PCR检测结果显示,3ml/L RNAiMAX和30nmol/L AQP4 siRNA以及6ml/LRNAiMAX和60nmol/L AQP4 siRNA转染星形胶质细胞24h、48h、72h时,AQP4 mRNA水平均降低80％以上(n=6).结论 Lipofectamine RNAiMAX可以介导siRNA转染入原代培养星形胶质细胞中并实现AQP4基因的沉默,3ml/L RNAiMAX和30nmol/L AQP4 siRNA即可达到理想的沉默效果.
基金：
国家自然科学基金资助项目(81271286)%北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养计划资助项目(2009-3-23)
第一作者：
第一作者机构：
[1]首都医科大学北京市神经外科研究所病理生理学室北京100050
推荐引用方式(GB/T 7714)：
张伟,徐立新,杨少华,等.脂质体RNAiMAX介导siRNA转染沉默星形胶质细胞AQP4基因[J].解剖学报.2014,45(2):161-165.
