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免疫性血小板减少症患儿骨髓间充质干细胞与其他来源的间充质干细胞免疫调节作用的比较研究

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收录情况: ◇ 统计源期刊

机构: [1]南宁广西医科大学研究生学院 [2]北京中国人民解放军海军总医院儿科 [3]郑州大学第一附属医院儿科 [4]北京首都医科大学附属北京儿童医院血液病中心
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关键词: 免疫性血小板减少症 间充质干细胞 骨髓 脐带 免疫调节

摘要:
目的比较免疫性血小板减少症(immunethrombocytopenia,ITP)患儿与正常人骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstem cells,BMMSCs)及脐带来源间充质干细胞(umbilical cordmesenchymalstem cells,UCMSCs)的性质及其对正常人外周血单个核细胞(peripheralblood mononuclearcell,PBMC)分泌干扰素γ(interferonγ,IFNγ)、白介素10(interleukin10,IL10)的调节能力.方法用密度梯度离心法体外分离培养16例ITP患儿和8例正常成人BMMSCs至56代,用酶消化法从10例健康胎儿脐带组织中分离培养UCMSCs至56代.在培养过程中观察三种来源间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)形态,进行细胞表面分子及成脂成骨分化鉴定并用细胞增殖检测试剂盒(CellCountingKit8,CCK8)检测三种 MSCs的增殖能力.将上述三种MSCs用丝裂霉素(mitomycinC,MMC)处理后与植物血凝素(phytohaemagglutinin,PHA)刺激的PBMC按不同比例(1∶40,3∶40,9∶40)混合培养3d,收集培养上清液.用酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)检测各组共培养上清液中IL10和IFNγ的含量.结果三种MSCs有相似的细胞形态,UCMSCs增殖速度最快,正常成人BMMSCs次之,ITP患儿BMMSCs最慢;三种MSCs有相似的分化能力.三种来源MSCs与PBMC以不同比例混合培养,随着MSCs比例的增加,PBMC分泌IL10增加,在ITP患儿BMMSCs组中不同比例之间差异有显著性(P<0.05),而在正常人BMMSCs、UCMSCs组中不同比例之间差异有非常显著性(P<0.01);随着MSCs比例的增加,PBMC分泌的IFNγ减少,在ITP患儿及正常人BMMSCs组中不同比例之间差异有显著性(P<0.05),而在UCMSCs组中不同比例之间差异有非常显著性(P<0.01).在相同共培养比例条件下,三种MSCs刺激 PBMC分泌 IL10和 IFNγ的量差异均无显著性(P>0.05).结论 ITP患儿BMMSCs较其他两种来源的MSCs增殖速度慢,说明其体外增殖存在缺陷.但ITP患儿BMMSCs与其他两种来源MSCs对PBMC分泌IL10、IFNγ的调节具有相同的特点,即促进IL10分泌,抑制IFNγ分泌,均呈剂量依赖性,即三种细胞调节PBMC分泌IL10及IFNγ能力未见明显差异.

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第一作者:
第一作者机构: [1]南宁广西医科大学研究生学院
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