摘要:
目的:观察神经干细胞、许旺细胞和组织工程支架材料乙交酯-丙交酯共聚物于大鼠髓内共移植后的生物相容性,及其对大鼠损伤脊髓形态和功能的修复作用.方法:实验于2005-05/2006-09在首都医科大学附属北京市神经外科研究所损伤修复实验室完成.①实验材料:健康成年雌性Wistar大鼠36只,随机数字表法分为单纯支架组、神经干细胞+支架复合体组、神经干细胞+许旺细胞+支架复合体组,12只/组.乙交酯-丙交酯共聚物由中科院化学研究所医用高分子材料中心提供.②实验方法:各组大鼠均建立脊髓T9半横断损伤模型.神经干细胞+许旺细胞+支架复合体组取2×1010L-1的许旺细胞、神经干细胞各10μL接种于乙交酯-丙交酯共聚物支架内,神经干细胞+支架复合体组取2×1010L-1的神经干细胞10μL接种于乙交酯-丙交酯共聚物支架内,单纯支架组取10μL DMEM培养液置于乙交酯-丙交酯共聚物支架内,于脊髓缺损处分别植入对应的复合物.③实验评估:应用电镜观察乙交酯-丙交酯共聚物支架的降解及轴突的再生状况;应用BBB评分和电生理技术检测大鼠脊髓功能性的恢复情况.结果:36只Wistar大鼠均进入结果分析.①行为学观察结果:移植术后4,12周,神经干细胞+支架复合体组、神经干细胞+许旺细胞+支架复合体组大鼠的后肢运动功能BBB评分均好于单纯支架组(P<0.01),其中神经干细胞+许旺细胞+支架复合体组尤为明显.②神经电生理检查结果:在脊髓半横断损伤后即刻,所有动物的体感诱发电位和运动诱发电位波幅都明显减低甚至消失.移植术后4周,神经干细胞+支架复合体组、神经干细胞+许旺细胞+支架复合体组大鼠的体感诱发电位和运动诱发电位波幅均有所恢复;至移植术后12周恢复明显.单纯支架组移植术后4,12周体感诱发电位和运动诱发电位波幅无明显变化.③电镜观察结果:扫描电镜下,随着时间的延长各组植入的乙交酯-丙交酯共聚物逐渐降解.透射电镜下,各组植入材料正中横断面可见新生的无髓及有髓神经纤维,至12周时神经干细胞+许旺细胞+支架复合体组最明显.结论:乙交酯-丙交酯共聚物在大鼠损伤的脊髓内具有良好的生物相容性;其与神经干细胞、许旺细胞共移植能够明显促进脊髓半横断损伤大鼠的脊髓轴突再生,并改善肢体的运动功能.