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RIFO杂交和限制性片段长度多态性检测耐利福平和异烟肼的结核分枝杆菌

Detection of rifampin and isoniazid resistant Mycobacterium tuberculosis by RIFO assay and PCR-RFLP

文献详情

资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C ◇ 中华系列

机构: [1]首都医科大学附属北京儿童医院儿科研究所100045 [2]俄罗斯圣彼得堡巴斯德研究所圣彼得堡197101 [3]北京胸科医院检验科
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关键词: 分枝杆菌 结核 抗药性 利福平 异烟肼 RIFO杂交

摘要:
目的 评价利福平寡核苷酸探针杂交技术(RIFO杂交)和PCR-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)在结核分枝杆菌(MTB)耐利福平(RIF)和异烟肼(INH)快速检测中的应用价值.方法 选取121株北京地区MTB菌株,分别采用RIFO杂交技术和PCR-RFLP检测RIF耐药相关基因rpoB核心区和INH耐药相关基因katG315位点突变,并对所有菌株的rpoB基因核心区进行测序验证.结果 RIFO杂交检测发现,91.5%(65/71)的RIF耐药株和92.9%(52/56)的耐多药菌株(至少对RIF和INH耐药)存在rpoB基因核心区突变,而RIF敏感株中未发现突变;RIFO杂交与测序结果完全一致,测序结果中有突变的位点在RIFO杂交中均有相应的野生型杂交信号缺失;PCR-RFLP结果显示,INH耐药株中katG315突变率为60.6%(40/66).结论 rpoB基因核心区可作为RIF耐药检测的分子标志及耐多药的筛选指标;RIFO杂交技术是检测MTB耐RIF的快速、准确的实验方法,具有推广及潜在的临床应用价值;PCR-RFLP可检测出大部分INH耐药株,可作为临床INH耐药性检测的辅助手段.

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第一作者:
第一作者机构: [1]首都医科大学附属北京儿童医院儿科研究所100045
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