摘要:
目的:本实验采用膜片钳单通道技术研究缺氧条件下对培养新生大鼠海马神经元钙激活钾通道的作用;方法:取1~3天的SD大鼠海马神经元组织,制成细胞悬液,加入含80%DMEM(dulbecco's modified eagle's medium)、20%小牛血清培养基进行培养,将培养3~5天的形态典型的神经元置于对称性高钾溶液中,用膜片钳技术记录单通道电流,其通道电流通过膜片钳放大器(CEZ-2200)放大,滤波(3KHz)后,经A/D、D/A转换器输入计算机,采用pClamp6.0.6软件采样分析;结果:在细胞贴附式下,应用氰化钠(20μmol/L)造成细胞急性缺氧,在缺氧早期(5~20min)通道开放概率增加(P<0.01或P<0.05,n=5),而缺氧后期(20~30min),通道开放概率明显降低,表明缺氧时间对通道的开放概率有明显影响.结论:缺氧早期神经元钙激活钾通道有自身激活作用,当钙激活钾通道激活时,钾离子外流增加,产生膜的复极化,使去极化不易产生,从而稳定细胞膜及降低细胞的兴奋性,这可能是缺氧早期神经元自身的一种代偿机制.