摘要:
本文报告对人脑胶质瘤细胞系BT325细胞骨架的免疫荧光研究,并比较了几种固定剂和缓冲液对不同细胞骨架成分的影响。除微管及微丝均被染色外,所有细胞均为波形纤维蛋白(vimentin)染色阳性,但只有部分细胞为胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色阳性。说明vimentin是BT325细胞内中间丝的主要成分,而GFAP仅在部分细胞内表达。实验结果还表明,甲醇与甲醛-丙酮、甲醛-Triton固定微管效果较好,而甲醇、醋酸酒精适用于中间丝的固定,甲醛固定也适用于微丝染色。如用Triton处理后进行染色,则缓冲液成分对微管与中间丝影响较大,而微丝不大受影响。本文还观察到,如在Triton处理后先用甲醛固定,再进行免疫染色,则vimentin染色很弱。如先进行免疫染色,然后再用甲醛固定,则vimentin染色很强。结果表明,甲醛固定对vimentin-分子上的抗原位点起遮蔽或破坏作用。