摘要:
目的:探讨转录因子c-Jun对培养的人血管平滑肌细胞(hVSMCs)中线粒体融合基因2(Mfn2)表达的调控作用.方法:①siRNA干扰实验:设正常对照组、阴性siRNA对照组和siRNA干扰组,用c-Jun siRNA转染hVSMCs,培养26 h后提取细胞mRNA和总蛋白.通过RT-PCR和Western blot检测Mfn2基因和蛋白质的表达.②过表达实验:设正常对照组、阴性病毒对照组和慢病毒过表达组.用慢病毒载体感染细胞,培养96 h后提取细胞mRNA和总蛋白.通过RT-PCR和Westem blot检测Mfn2基因和蛋白质的表达.结果:siRNA敲减c-Jun后,与阴性siRNA对照和正常对照组相比,siRNA干扰组Mfn2 mRNA明显降低[(0.671±0.061) vs.(1.110:±:0.080),P<0.01;(0.671:±0.061) vs.(1.000±0),P<0.01],蛋白质的表达也显著降低[(0.571±0.049) vs.(1.042±0.039),P<0.01;(0.571±0.049)vs.(1.000±0),P<0.01],hVSMCs的数量明显增加.相反,用慢病毒表达载体过表达c-Jun后,与阴性病毒对照和正常对照组相比,慢病毒过表达组Mfn2 mRNA明显增加[(1.414±0.063) vs.(1.056±0.020),P<0.01;(1.414±0.063) vs.(1.000±0),P<0.01],蛋白质的表达也显著增加[(1.449±0.044) vs.(1.089±0.026),P<0.01;(1.449±0.044) vs.(1.000±0),P<0.01],hVSMCs的数量则明显下降.结论:c-Jun能显著正调控Mfn2的表达,并影响hVSMCs的增殖.因此,它可能是Mfn2表达的转录调控因子.