资源类型：
期刊
收录情况：
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文章类型：
机构：
[1]100029首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所心血管重塑相关疾病教育部重点实验室科研基地建设-心血管重大疾病协同创新中心
首都医科大学
首都医科大学附属安贞医院
首都医科大学附属北京安贞医院
出处：
中华老年医学杂志.2016,35(7):768-772.
ISSN：
0254-9026
关键词：
小鼠
基因敲除
外显子
摘要：
目的 利用CRISPR/Cas9系统建立钙结合蛋白S100a9基因外显子定向敲除小鼠.方法 在S100a9基因第1个外显子5 '端及第2个外显子3 '端设计gRNA靶点,体外转录获得gRNA,利用Cas9蛋白体外检测gRNA切割效率.选取效率高的gRNA和Cas9 mRNA注射C57BL/6小鼠受精卵,进行胚胎移植,利用PCR和测序方法检测F0代小鼠S100a9基因外显子敲除情况. 结果 F0代出生9只小鼠,PCR鉴定其中4只具有长片段删除,效率为44.4％;测序鉴定3只小鼠完全敲除了第1和第2外显子,1只敲除了第2外显子. 结论 成功建立利用CRISPR/Cas9系统定向敲除基因外显子的方法,获得了S100a9基因第1和第2外显子敲除的小鼠.
基金：
国家自然科学基金(81300120)%北京市自然科学基金(7142030)%北京市科技新星计划(Z151100000315067)National Natural Science Foundation of China(81300120)%Beijing Natural Science Foundation(7142030)%Beijing Nova Program(Z151100000315067)
第一作者：
刘燕
第一作者机构：
[1]100029首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所心血管重塑相关疾病教育部重点实验室科研基地建设-心血管重大疾病协同创新中心
推荐引用方式(GB/T 7714)：
刘燕,张晓萍,王绿娅,等.利用CRISPR/Cas9技术建立基因外显子敲除小鼠模型[J].中华老年医学杂志.2016,35(7):768-772.
