摘要：
目的 优化细胞周期测定实验样品制备条件.方法 T47D细胞株经乙醇固定后,加入RNase A消化细胞内RNA,加入碘化丙啶(PI)标记DNA,用流式细胞仪检测细胞内DNA含量,ModFit软件分析细胞周期.采用此方法研究样品制备过程中固定时间(30 min,4 h,24 h,48 h,7天和14天)和RNase A对细胞周期检测结果的影响.结果 固定不同时间,G0/G1期、S期和G2/M期细胞比例变化范围分别为(57.79±0.90)%～(60.58±1.90)%,(20.16±1.55)%～(24.07±1.04)%和(17.32±0.62)%～(19.45±0.86)%,各组间差异无统计学意义(P＞0.05);变异系数的变化范围为(5.77±0.24)%～(7.72±0.28)%,各组间差异无统计学意义(P＞0.05);无RNase A组与有RNase A组相比,G0/G1期的细胞比例差异无统计学意义(t=1.59,P＞0.05),S期、G2/M期的细胞比例和变异系数的差异有统计学意义(P值均小于0.01,t值分别为-9.46,12.78和-7.99),S期升高,G2/M期降低,变异系数增大.结论 ①细胞周期测定实验样品处理过程中,细胞固定30 min后即可上机测试,且细胞固定后的保存时间可长达两周;②RNase A对细胞周期测定实验结果影响较大.
