目的:建立测定人血浆中替考拉宁浓度的高效液相色谱-紫外检测（HPLC-UV）法,为临床个体化给药提供依据。方法:以哌拉西林钠为内标,将400μL血浆样本采用600μL乙腈沉淀蛋白后,再用二氯甲烷萃取,采用HPLC测定,色谱柱为kromasil柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为水(含0.01 mol·L-1磷酸二氢钾,用磷酸调pH至2.84)-乙腈（75∶25,v/v）,流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,进样量20μL,检测波长为240 nm。结果:替考拉宁在3.12～100.00μg·mL-1范围内线性关系良好（R2=0.999 9）,定量下限为3.12μg·mL-1;日内、日间精密度的RSD为0.39%～8.54%,相对偏差为–7.19%～7.00%。血浆样品在经历3次冻融（–20℃到室温）循环、4℃放置6 d和冷冻（–40℃）放置21 d等条件下均稳定,处理后样品在自动进样器中（4℃）放置24 h均稳定（RSD(15%）。测定9例应用替考拉宁患者的血药浓度,仅有2例在有效血药浓度范围。结论:该法操作简便、灵敏、准确,适用于替考拉宁血药浓度的测定。