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摘要:
本发明提供一种细胞模型及其制备方法、应用,提供了利用WS体细胞诱导多能干细胞的制备方法,包括如下步骤:S1、源于WS患者体细胞的获取;S2、将表达人端粒酶逆转录酶和抗性基因的载体转染至获取的体细胞并培养,筛选能够表达人端粒酶逆转录酶的体细胞;S3、向S2中的体细胞中转染携带有诱导iPSCs的重编程基因的载体并培养;本发明通过在WS的体细胞重编程前转入能够表达人端粒酶逆转录酶hTERT的载体,使得WS的体细胞可以重编程为多能干细胞,提高iPSCs诱导效率,解决了现有技术中利用WS患者体细胞不能成功诱导多能干细胞或诱导效率极低的问题。
主权项:
1.一种利用沃纳综合征(WS)患者的体细胞诱导多能干细胞的方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、源于WS患者的体细胞的获取;获取的WS体细胞为成纤维细胞AG03141;S2、将同时表达人端粒酶逆转录酶和抗性基因的载体转染至所述体细胞中并进行培养,筛选出能够表达人端粒酶逆转录酶的所述体细胞;所述表达人端粒酶逆转录酶的骨架载体为慢病毒载体;所述的慢病毒载体为pLVX-Tight-Puro;S3、向S2步骤中筛选的所述体细胞中转染携带有诱导iPSCs的重编程基因的载体,并进行iPSCs培养;所述重编程基因为OCT4、SOX2、c-MYC和KLF-4;所述载体为仙台病毒。