目的 β淀粉样蛋白前体蛋白裂解酶1（β-site APP cleaving enzyme 1， BACE1）是阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease， AD）中淀粉样斑块形成的限速酶，其表达水平与活性在AD发生发展中起到关键作用。BACE1的相互作用蛋白可以通过直 接结合、间接结合、参与各种细胞信号转导通路等方式，直接或间接在BACE1的转录、翻译、修饰、胞内运输等各个环节 对BACE1进行调节，从而参与AD的发生与疾病的进程。本研究拟筛选并验证BACE1的相互作用蛋白，为进一步深入阐明 淀粉样斑块形成的机制提供新的依据。方法　采用免疫共沉淀 （co-immunoprecipitation，Co-IP）与质谱联合应用的技术富 集并鉴定AD模型小鼠海马组织中BACE1的相互作用蛋白，通过生物信息学分析筛选与BACE1有潜在相互作用的蛋白质， 采用Co-IP实验及免疫荧光共聚焦技术进行初步验证，并探究BACE1相互作用蛋白在AD细胞模型中蛋白质表达水平变化。 结果　本研究在 AD 组中共鉴定到与 BACE1 相互作用的差异表达蛋白 614 个。基因本体 （GO） 富集分析显示，AD 组 BACE1相互作用蛋白主要参与细胞内信号转导、靶向高尔基体囊泡的转运、浦肯野细胞层发育等生物学过程；京都基因与 基因组百科全书 （KEGG） 分析显示，AD中BACE1相互作用蛋白主要参与了PI3K-Akt信号通路、mTOR信号通路等神经 退行性疾病相关通路。通过构建BACE1相互作用蛋白网络，筛选了12个可信度较高的相互作用蛋白，其中NSF、NUMB、 HSP90aa1、SNAP91为首次发现的BACE1相互作用蛋白。经进一步验证，发现NSF与BACE1存在相互作用，并且在AD细 胞模型中 NSF 表达水平上调。结论 BACE1 相互作用蛋白参与多种 AD 相关生物途径及信号通路，NSF 为新鉴定到的 BACE1相互作用蛋白，与BACE1存在相互作用。NSF在AD细胞模型中表达水平上调，预测NSF与BACE1蛋白间相互作 用参与调节AD疾病的进程，为疾病的机制研究提供新的靶点和方向。