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miR-146b-5p 下调促进巨噬细胞与胶质瘤干细胞融合后恶性转化的分析

Down-regulation of miR-146b-5p promotes malignant transformation of fusion cells after co-culture of macrophages with glioma stem cells in vitro

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C ◇ 中华系列

机构: [1]苏州大学附属第二医院神经外科,215004
出处:
ISSN:

关键词: 巨噬细胞 胶质瘤干细胞 恶性转化 双色荧光示踪 miR-146b-5p

摘要:
目的:观察在巨噬细胞( Mφ)-胶质瘤干细胞( GSCs )双色荧光示踪体外共培养模型中,二者间的相互作用,以多指标验证融合细胞的存在及其生物学特性,并分析相关分子机制。方法将红色荧光蛋白基因稳定转染的人GSCs细胞株SU4-RFP,与源于绿色荧光蛋白( EGFP) Balb/c裸小鼠的Mφ体外共培养,细胞工作站下观察SU4-RFP与Mφ间的包括融合在内的多种相互作用,克隆高增殖力RFP/EGFP双阳性细胞,以免疫印迹、荧光探针原位杂交( FISH)、免疫细胞化学染色和染色体核型分析多指标鉴定融合细胞,命名为Mφ与GSCs的融合细胞( F-Mφ),分析其生物学特性及相关分子机制。结果体外共培养发现高增殖力EGFP/RFP双阳性细胞存在,单克隆并连续传代后在转录、翻译及荧光蛋白表达水平均证实RFP和EGFP共表达。融合细胞共表达Mφ标志物CD68和GSCs标志物Nestin,兼具两种细胞特征性染色体,证实其源于SU4-RFP与Mφ的自发融合。融合细胞的增殖速度、侵袭能力均高于SU4-RFP。融合细胞转染miR-146b-5p后,STAT3表达下降,凋亡率上升(18.83%),而致瘤率(4/5)及肿瘤体积(9.7 mm ±1.6 mm)均下降。结论 Mφ可与GSCs自发融合,融合细胞转化后恶性程度更高,与miR-146b-5p下调介导STAT3通路激活相关。

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第一作者:
第一作者机构: [1]苏州大学附属第二医院神经外科,215004
通讯作者:
通讯机构: [1]苏州大学附属第二医院神经外科,215004
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