目的：了解细菌和真菌性中枢神经系统（CNS）感染病原谱，并探讨通用引物聚合酶链反应（PCR）检测技术的病原学诊断价值。方法收集某院2009年1月—2015年3月疑似或确诊 CNS 细菌或真菌性感染患者资料，分析其脑脊液培养病原菌种类，采用细菌16S rRNA 和真菌28S rRNA 通用引物对患者脑脊液 DNA 进行 PCR扩增和序列测定，并与同期脑脊液培养及鉴定结果进行比较。结果共收集确诊或疑似 CNS 细菌或真菌感染者400例，其中脑脊液培养阳性132例。共分离病原菌150株，其中革兰阳性菌48株，革兰阴性菌90株，真菌12株；居前3位的细菌为鲍曼不动杆菌（32株）、凝固酶阴性葡萄球菌（16株）和肺炎克雷伯菌（13株）；最常见真菌为新生隐球菌（8株）。选取88份感染患者脑脊液标本和20例非感染患者脑脊液进行 PCR 扩增，PCR 扩增法灵敏度（35．23％，31／88）高于培养法（28．41％，25／88）（χ2＝4．17，P ＜0．05）。PCR 扩增和培养法阴性预测值分别为25．97％、24．10％，两种方法的特异度、阳性预测值均为100．00％。PCR 扩增测序与培养结果符合率为84．00％（21／25）；PCR 检测平均报告时间（48 h）较培养结果报告时间（细菌平均约72 h，真菌平均约96 h）更快速。结论 CNS 感染病原分布广泛，以革兰阴性菌为主；通用引物 PCR 检测具有快速、灵敏、准确等特点，具有良好的临床推广和应用价值。