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两种热量限制方式对SH-SY5Y细胞氧化损伤作用的比较

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收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C

机构: [1]首都医科大学宣武医院中心实验室,北京老年病医疗研究中心,神经变性病教育部重点实验室 [2]北京市门头沟区医院呼吸科 [3]北京市门头沟区医院超声科
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ISSN:

关键词: 热量限制 白藜芦醇 低糖 SH-SY5Y细胞 过氧化氢损伤

摘要:
目的:研究体外热量限制的两种处理方法(低糖和白藜芦醇)在H2 O2诱导的 SH-SY5Y细胞损伤中的保护作用。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为对照组(3.0 g/L-葡萄糖)、H2O2损伤组(250μmol/L H2O2)、低糖组(2.0 g/L-glucose)、低糖+损伤组、白藜芦醇(1.25、5μmol/L)组、白藜芦醇(1.25μmol/L)+损伤组。观察细胞形态,测定各组细胞的噻唑蓝( MTT)代谢率,乳酸脱氢酶( LDH)漏出率。结果用低糖和不同浓度白藜芦醇预处理细胞24 h后MTT法测定570 nm OD值显示,与对照组比较,低糖组细胞活力上升(P<0.01);白藜芦醇1.25μmol/L组活力稍有上升,但无统计学差异( P>0.05);且低糖组较白藜芦醇1.25μmol/L组活力明显升高( P<0.01)。白藜芦醇5μmol/L组显示活力下降( P<0.05),选用白藜芦醇1.25μmol/L作为后续实验用浓度。用低糖和白藜芦醇预处理细胞24 h,给予250μmol/L H2 O2损伤1 h后测定MTT代谢率显示,与对照组相比,损伤组活力明显下降,低糖组和白藜芦醇组活力上升(P<0.01);与损伤组相比,低糖+损伤组、白藜芦醇+损伤组活力上升(P<0.01);低糖+损伤组OD值明显高于白藜芦醇+损伤组( P<0.01)。继续培养至7 h发现,与损伤组相比,低糖+损伤组活力明显上升,白藜芦醇+损伤组活力下降(P<0.01)。进一步检测LDH漏出率显示,损伤1 h后结果显示,与对照组相比,损伤组漏出率明显增加(P<0.05),低糖组、白藜芦醇组漏出率稍有减少,但无统计学差异;与损伤组比较,低糖+损伤组漏出率明显减少(P<0.01),白藜芦醇+损伤组漏出率减少(P<0.05);继续培养至7 h显示,低糖组漏出率增加5%;低糖+损伤组漏出率增加11%;白藜芦醇+损伤组增加48%( P<0.01);白藜芦醇+损伤组漏出率高于低糖+损伤组( P<0.01)。细胞形态学观察显示,未加损伤之前,低糖组、白藜芦醇组的细胞形态,与对照组比较无明显改变。加入损伤药物1h后,各组的细胞形态与对照组比较无明显改变。加入损伤药物7h后,低糖组、低糖+损伤组和对照组细胞贴壁性好,突起伸展良好细长,透光性好;损伤组和白藜芦醇+损伤组可见细胞数目明显减少,死细胞多,突起回缩,细胞明显变圆,贴壁性不好,透光性差。结论低糖模拟热量限制抗氧化应激损伤效应明显优于白藜芦醇,是一种较好的体外模拟热量限制的细胞模型。

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第一作者:
第一作者机构: [2]北京市门头沟区医院呼吸科
通讯作者:
通讯机构: [1]首都医科大学宣武医院中心实验室,北京老年病医疗研究中心,神经变性病教育部重点实验室
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