资源类型：
收录情况：
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
文章类型：
机构：
[1]首都医科大学宣武医院老年病研究所细胞治疗室,北京100053
首都医科大学宣武医院
[2]教育部神经变性病重点实验室,北京100053
[3]国家人类基因组北方研究中心,北京100176
[4]空军第三通信修理所卫生所,北京 100175
出处：
ISSN：
关键词：
绿色荧光蛋白
胚胎干细胞
分化
摘要：
目的 观察小鼠胚胎干细胞(ES)移植入大鼠脑内后绿色荧光蛋白(GFP)质粒和Thy-1抗体在指示细胞及细胞分化方面的特点.方法 标记方法一:将p-EGFP-N1质粒转入ES细胞,连续10代抗生素筛选表达GFP的GFP-ES,并将GFP-ES移植入活体大鼠脑内.取材后冰冻切片,在荧光显微镜下观察切片上的绿色荧光.标记方法二:直接移植胚胎干细胞后取材,用特异性抗小鼠Thy-1抗体作移植细胞的免疫组织化学染色,荧光显微镜下观察.另外,两种标记方法均做神经元和胶质细胞的特异抗体神经细胞核抗体(NeuN)和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的免疫组织化学染色,观察是否与GFP或Thy-1抗体双标记,以此判定细胞分化情况.结果 GFP质粒转化后的ES细胞团和单细胞均表达亮绿色的GFP,转化效率为30%;移植21d后,大鼠脑内存活的移植细胞仍表达GFP,但不能和NeuN、GFAP的染色双标记.大量Thy-1阳性的植入细胞和NeuN、GFAP双标记.结论 GFP质粒标记胚胎干细胞后移植可以较好地显示移植细胞,但不能观察细胞分化;而Thy-1抗体不仅在显示移植细胞上有较好的效果,还可以准确地标记分化细胞.
基金：
国家自然科学基金 (30940039,30970939) ; 国家重点基础研究发展计划 (973计划) (2006CB943703) ; 北京市科委科技计划 (H020220010290)
PubmedID：
第一作者：
第一作者机构：
[1]首都医科大学宣武医院老年病研究所细胞治疗室,北京100053
[2]教育部神经变性病重点实验室,北京100053
推荐引用方式(GB/T 7714)：
关云谦,谢淑,孙静敏,等.小鼠胚胎干细胞移植后两种示踪方法的比较[J].中国医学科学院学报.2010,32(4):445-448,后插四,后插五.
