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干细胞脑内移植有效标记研究:绿色荧光蛋白质粒标记的应用价值

Effective labeling of stem cell transplantation in vivo:the application value of green fluorescent protein plasmid labeling

文献详情

资源类型:
机构: [1]首都医科大学北京宣武医院,北京老年医学研究所神经生物学室,北京市,100053, [2]首都医科大学北京宣武医院,北京老年医学研究所细胞治疗中心,北京市,100053 [3]首都医科大学北京宣武医院,神经内科,北京市,100053
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ISSN:

关键词: 干细胞 胚胎/细胞学 神经元 神经胶质原纤维酸性蛋白质 星形细胞

摘要:
目的:观察绿色荧光蛋白(greenfluorescent protein,GFP)质粒转化小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)的效果,以及将转化的胚胎干细胞移植入正常大鼠纹状体后,GFP质粒作为细胞存活情况示踪剂的效果.方法:首先利用感受态大肠杆菌提取大量高纯度GFP质粒DNA,然后将GFP质粒与脂质体孵育形成的转化复合物和小鼠胚胎干细胞共同孵育,使GFP质粒转入胚胎干细胞;筛选表达GFP的胚胎干细胞.将筛选后表达GFP的ESC移植入活体大鼠纹状体内,移植21 d后,观察表达绿色荧光蛋白的移植细胞的存活情况.结果:GFP质粒转化以后的ES细胞团和单细胞都表达亮绿色的GFP,细胞打散计数证实大约60%的细胞携带GFP,移植21 d后,大鼠脑内可见大量表达GFP的移植细胞.结论:脂质体可以将GFP质粒转入鼠的胚胎干细胞,携带有GFP的ES移植后21 d,GFP可以作为示踪剂观察移植细胞的存活状况.脂质体辅助的GFP质粒转化胚胎干细胞是移植示踪的较好方法.

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第一作者:
第一作者机构: [1]首都医科大学北京宣武医院,北京老年医学研究所神经生物学室,北京市,100053, [3]首都医科大学北京宣武医院,神经内科,北京市,100053
通讯作者:
通讯机构: [1]首都医科大学北京宣武医院,北京老年医学研究所神经生物学室,北京市,100053, [3]首都医科大学北京宣武医院,神经内科,北京市,100053
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