摘要:
目的:采用"五步法"将鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)诱导成为神经元和胶质细胞.方法:首先将ES细胞接种到铺有明胶的培养瓶里,在无滋养层细胞的情况下生长3 d,然后将细胞悬浮培养4 d成为胚胎体(,胚胎体经过无血清培养基培养6 d,富集nestin阳性细胞,在有丝分裂原bFGF作用下扩增6 d,最后经过烟酰胺诱导分化6 d,共计经过5个步骤.结果:诱导出多量表达Tuj-1的不成熟神经元(约占分化后细胞数量的80%~90%)和表达神经胶质纤维酸性蛋白的星形胶质细胞(5%~10%),还有少量表达微管相关蛋白Ⅱ的成熟神经元(5%~10%).结论:"五步法"诱导使胚胎干细胞在分化过程中处于不同的阶段,最终诱导出大量不成熟的神经元,少量星型胶质细胞和成熟神经元.为利用不同成熟度的分化细胞移植治疗神经系统疾病提供了充足的细胞来源.