摘要:
目的 观察全反式视黄酸(RA)对体外培养的人神经前体细胞的诱导作用,研究在这个过程中细胞周期调节蛋白p27Kip1、p21Cip1及相关分子cdk2、cyclinE的变化,探讨p27Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中的作用.方法 取12 wk的人胚胎前脑纹状体,原代培养人神经前体细胞.在细胞进入对数生长期时给予1 μmol·L-1 RA诱导.在诱导的d 1、3、7,用相差显微镜观察细胞形态的变化;用免疫细胞化学染色、RT-PCR等方法检测p27Kip1、p21Cip1及其相关的cdk2、cyclinE的变化.结果 在RA诱导d 3,人神经前体细胞形态发生变化,至d 7时已接近成熟神经元形态.免疫细胞化学染色结果显示p27Kip1的表达在RA诱导d 3增加,在RA诱导d 7时明显增加,与未经RA诱导的细胞相比差异有统计学意义(P<0.05).RT-PCR结果显示,p27Kip1mRNA的表达在RA诱导d 3增加,并在RA诱导d 5达到高峰,而p21Cip1mRNA的表达在RA诱导后略呈下降趋势.cdk2、cyclinE的mRNA水平在RA诱导前后没有明显变化.结论 p27Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中具有重要作用,并且其表达增加是通过转录水平调节的.