摘要：
目的 建立简单、有效而稳定的大鼠肝脏Kupffer细胞分离、纯化的实验方法.方法 ①大鼠肝脏的胶原酶离体灌注;②Percoll液不连续梯度离心分离Kupffer细胞;③选择性贴壁纯化Kupffer细胞;④吞噬墨汁实验、DAB染色,光镜、电镜下观察鉴定Kupffer细胞.结果 最终获得的大鼠肝脏Kupffer细胞活性＞90%,纯度为95%,光镜下Kupffer细胞具有较强的贴壁及吞噬碳粒能力,DAB染色呈黄色煎蛋样结构;新分离的Kupffer细胞呈圆形,形态大小一致;2d后,细胞发生伸展,呈多角形或星形.电镜下观察可见典型特点:有伪足及杯口状改变,有丰富的溶酶体和吞噬体.结论 本实验建立的大鼠肝脏Kupffer细胞的分离培养方法效果稳定,同时培养的细胞具有良好的生物学性状.
