摘要:
目的探索新生鼠胰岛干细胞体外分离鉴定、培养以及体外分化的方法.方法用胶原酶消化新生大鼠胰腺,将消化的组织碎片在pH7.4~7.6条件下经含血清RPMI 1640及无血清RPMI 1640(添加bFGF,EGF,N2)培养液中培养,观察形成类胰岛样细胞团的全过程.用胰岛素释放实验检测胰岛功能,免疫荧光法检测nestin的表达.结果胰腺消化碎片培养36h内,可见nestin阳性细胞贴壁,添加bFGF,EGF,N2后nestin阳性细胞快速增长,18~24d形成类胰岛样细胞团,并可表达胰岛素.结论胰腺细胞中nestin阳性细胞具有胰岛干细胞特点,经体外培养可获得类胰岛样细胞团.