摘要：
目的探索新生大鼠胰腺nestin阳性细胞体外分离、培养并使之形成类胰岛样细胞团的方法.方法应用胶原酶消化新生大鼠胰腺,将消化的组织碎片培养形成类胰岛样细胞团后传代.免疫荧光细胞化学法检测贴壁细胞胰岛素、胰高血糖素及nestin的表达.RT-PCR检测培养1周的贴壁细胞nestin及细胞角蛋白(CK19)的表达.结果在pH 7.6条件下培养24～36 h有部分细胞贴壁生长,改用pH 7.4无血清RPMI 1640培养液培养18～24d可形成类胰岛样细胞团,传代后可有单层细胞生长.培养24～36 h的贴壁细胞nestin呈阳性,但胰岛素、胰高血糖素阴性,形成的类胰岛样细胞团传代后24 h胰岛素、胰高血糖素呈阳性.培养1周的单层细胞经RT-PCR扩增获得nestin片段,但未获得CK19相应的片段.结论类胰岛样细胞团传代培养后可表达胰岛素、胰高血糖素;胰腺nestin阳性细胞具有胰岛干细胞的特点.
