资源类型：
文章类型：
机构：
[1]首都医科大学宣武医院肾内科,北京100053
肾科
首都医科大学宣武医院
[2]首都医科大学附属北京友谊医院肾内科,北京100053
首都医科大学
首都医科大学附属北京友谊医院
[3]中国医学科学院 中国协和医科大学基础医学院生理室,北京100730
出处：
ISSN：
关键词：
淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶
肾小管上皮细胞
反义RNA
重组腺病毒
摘要：
目的:观察淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶(Lck)在肾小管上皮细胞中的表达及Lck反义RNA对其表达的影响.方法:采用RT-PCR方法从肾小管上皮细胞中获得Lck目的基因片段,将目的基因片段反向插入pDC 316质粒中,构建Lck反义RNA穿梭质粒(pDC 316-antisenseLck),经PCR、酶切及测序鉴定正确后,将此穿梭质粒与辅助质粒pBHGloxΔE1,3Cre 共转染HEK 293细胞,重组产生Lck基因反义RNA腺病毒载体(Ad-antisenseLck).用此重组腺病毒感染体外培养的肾小管上皮细胞,Western blotting方法观测此重组腺病毒载体对IL-2诱导的Lck蛋白表达的影响.结果:构建出Lck反义RNA重组腺病毒载体,此重组腺病毒载体感染培养的肾小管上皮细胞后可明显抑制IL-2诱导的Lck蛋白表达(P<0.05),抑制率可达47%.结论:成功构建出Lck反义RNA重组腺病毒载体,此载体可在肾小管上皮细胞内发挥生物学作用,显著阻抑肾小管上皮细胞的Lck蛋白表达.
基金：
北京市自然科学基金资助项目(No.7022012)；
第一作者：
第一作者机构：
[1]首都医科大学宣武医院肾内科,北京100053
通讯作者：
通讯机构：
[2]首都医科大学附属北京友谊医院肾内科,北京100053
推荐引用方式(GB/T 7714)：
邓英辉,李清刚,任崇余,等.Lck反义RNA重组腺病毒载体的构建及其对肾小管上皮细胞Lck表达的影响[J].中国中西医结合肾病杂志.2006,7(7):386-390.
