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分泌性BACE1蛋白在昆虫细胞的表达

Eukaryotic Expression of Soluble BACE1 in Insect Cells

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资源类型:
机构: [1]首都医科大学宣武医院 [2]清华大学生物科学与技术系神经生物学实验室
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关键词: β-secretase 真核表达 昆虫细胞 Alzheimer's病

摘要:
为了获得有活性的重组β-secretase并研究其功能,寻找特异性抑制剂,应用RT-PCR技术,从人胚胎脑组织特异性扩增并克隆了人BACE1编码基因的胞外片断(BACE1-454).测序后与质粒pFastBac连接,得到含BACE1-454基因的重组质粒pFast-BACE1-454.将其转化到含有杆状病毒穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中进行转座重组,用琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增对重组穿梭载体Bacmid-BACE1-454进行鉴定.将Bacmid-BACE1-454经脂质体介导转染Sf9细胞,收获病毒.用重组杆状病毒颗粒感染昆虫细胞,表达蛋白,免疫印迹证实所获蛋白产品具有特异的免疫反应性.

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第一作者:
第一作者机构: [1]首都医科大学宣武医院 [2]清华大学生物科学与技术系神经生物学实验室
通讯作者:
通讯机构: [2]清华大学生物科学与技术系神经生物学实验室
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