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机构：
[1]首都医科大学宣武医院神经内科 北京100053
神经内科
首都医科大学宣武医院
出处：
ISSN：
关键词：
PS1(Presenilin 1)
基因突变
绿色荧光蛋白
SH-SY5Y
摘要：
目的为了对我们发现的中国人家族性阿尔茨海默病早老素-1(presenilin 1,PS1)基因新的点突变进行蛋白功能研究,分别构建野生型和突变型PS1(G289T)与绿色荧光蛋白(EGFP)共表达载体,并检测其在SH SY5Y细胞内的表达.方法利用含人全长PS1cDNA的pcDNA3.1(zeo+),采用定点突变技术,构建PS1(G289T)-pcDNA3.1(zeo+)载体.采用基因重组技术构建野生型和突变型PS1与绿色荧光蛋白共表达载体.应用脂质体将携带野生型和突变型PS1的质粒转染至SH-SY5Y细胞,检测报告基因表达,RT-PCR检测PS1mRNA表达.结果经限制性内切酶酶切图谱分析及DNA测序证实融合蛋白表达载体构建成功;RT-PCR产物经测序显示突变型PS1mRNA在SH-SY5Y中有表达.结论成功构建了人野生型和突变型PS1与EGFP共表达载体并成功转染至SH-SY5Y细胞,为进一步的研究工作奠定了基础.
基金：
:国家自然科学基金资助项目(项目批准号30370494)；
第一作者：
第一作者机构：
[1]首都医科大学宣武医院神经内科 北京100053
通讯作者：
通讯机构：
[1]首都医科大学宣武医院神经内科 北京100053
推荐引用方式(GB/T 7714)：
邵延坤,贾建平,方伯言,等.野生型与突变型PS1真核表达载体的构建及其在SH-SY5Y细胞中的表达[J].中国实验诊断学.2005,9(6):853-856.
