摘要：
目的:用经济、简便、快捷的方法得到大量、高纯度的α-突触核蛋白.方法:将重组的proEXNACP,pGEXNACPH和pTYBNACP质粒分别转入大肠杆菌DH5α,BL21和ER2566细胞进行培养增菌,IPTG诱导产生α-突触核蛋白;超声破碎、离心粗提取得到融合的α-突触核蛋白;分别经Ni-NTA resin,Glutathione Sepharose 4B和Chitin Beads纯化,得到α-突触核蛋白.用SDS-PAGE电泳观察纯度、Western杂交检测正确性、用BCA蛋白定量法测定蛋白含量.结果:3种方法均能得到较高纯度的α-突触核蛋白,其中用Ni-NTA resin提取纯化的α-突触核蛋白的纯度最高;蛋白收获量分别是10 mg/L,5 mg/L和5 mg/L;经济耗费和实验的繁简程度没有较大差异.结论:3种方法均可作为α-突触核蛋白的提取方法.
