摘要:
目的 利用原代培养肝细胞 ,研究鹅脱氧胆酸损害肝细胞机制。方法 SD大鼠肝细胞原代短期培养 ,分别加入不同浓度的甘氨鹅脱氧胆酸 (glycochenodeoxycholate ,GCDC)后 ,流式细胞术检测凋亡细胞和坏死肝细胞的比例 ;抽提DNA电泳 ;涂片后生物素 dUTP标记凋亡细胞。胆总管结扎SD大鼠肝组织免疫组织化学染色检测Bcl 2基因表达。肝细胞与 10 0 μmol/LGCDC和不同浓度的果糖培养后 ,同法流式细胞术检测凋亡细胞的比率。结果 加入GCDC后肝细胞的凋亡率随着GCDC的浓度增加和作用时间的延长而增加 (2 9%到 6 2 % ,P <0 0 1) ;坏死细胞率和凋亡细胞率之间无相关性 (r=0 45 71,P >0 0 5 )。胆总管结扎后早期 (3、7d)Bcl 2表达阴性 ,结扎 14d后Bcl 2表达阳性。相同条件下 ,10 0 μmol/L的GCDC作用胆总管结扎组肝细胞的凋亡率较正常对照组肝细胞低(P <0 0 5 )。随着果糖浓度的提高 ,肝细胞的凋亡率逐渐降低 (5 0± 4) %到 (2 8± 4) %。果糖浓度与肝细胞凋亡率密切相关 (r=0 9772 ,P <0 0 1)。结论 GCDC诱发肝细胞凋亡。机体通过表达Bcl 2基因拮抗GCDC诱导的凋亡。果糖对GCDC诱发肝细胞凋亡有保护作用。