背景:神经干细胞的发现为中枢神经系统损伤修复带来希望,但脑损伤后的内部环境对神经干细胞存活和分化的影响是一个复杂多变的过程.目的:观察大鼠脑液压冲击伤后植入的人胚神经干细胞存活情况和分化状态.设计:开放性实验.单位:广东省中医院神经外科,北京市神经外科研究所.材料:实验于2002-09/2003-03在北京市神经外科研究所神经干细胞室完成.选取SD雌性大鼠24只(购自中国医学科学院实验动物研究所,动物质量合格证号:SCXK(京)2002-2003),7周龄,体质量(250±10)g.8周龄流产胎儿大脑(产妇及其家属均同意提供),流产过程中B超监测胎儿的存活状况.BrdU单克隆抗体(Sigma公司),兔抗巢蛋白多克隆抗体(Chemicon 公司),鼠抗微管相关蛋白2单克隆抗体(Neomarkers 公司),兔抗胶质纤维酸性蛋白多克隆抗体(Biogenex 公司).方法:①取8周龄流产胎儿大脑皮层细胞,体外培养获得人胚神经干细胞.②大鼠制作液压冲击伤模型.大脑皮质运动感觉区骨窗位置:以前囟为零点,向后2.5 mm,中线右3.0 mm.液压冲击参数:冲击压力0.3 Mpa,冲击时间25 ms,冲击次数为1次.③伤后24 h在损伤区移植标有BrdU的人胚神经干细胞,1周和4周后处死大鼠,邻片行BrdU/微管相关蛋白2和BrdU/胶质纤维酸性蛋白免疫组织化学双染.主要观察指标:①人胚神经干细胞移植后的存活及迁移.②人胚神经干细胞移植后的分化.结果:①BrdU阳性细胞为椭圆形棕褐色,移植后1,4周均可见其存活并向周围迁移,且移植后4周迁移的范围更广.②移植后1周,皮质颗粒层和皮层下均见较多的BrdU阳性细胞,且BrdU/微管相关蛋白2双阳性细胞多于BrdU/胶质纤维酸性蛋白双阳性细胞;移植后4周,BrdU阳性细胞数明显减少,脉络丛和微血管中可见BrdU阳性细胞,且BrdU/胶质纤维酸性蛋白双阳性细胞多于BrdU/微管相关蛋白2双阳性细胞.结论:人胚神经干细胞能够存活于脑损伤区域,移植后逐渐分化为星形胶质细胞,且易被内皮吞噬细胞所消化.提示免疫排斥反应可能影响人胚神经干细胞的存活.