资源类型：
期刊
收录情况：
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
◇ 中华系列
文章类型：
论著
机构：
[1]北京市神经外科研究所首都医科大学100050
研究所
北京市神经外科研究所
首都医科大学
首都医科大学附属天坛医院
[2]100050首都医科大学北京市神经外科研究所
研究所
北京市神经外科研究所
首都医科大学
首都医科大学附属天坛医院
[3]首都医科大学附属北京天坛医院神经外科
重点科室
诊疗科室
神经外科
神经外科
首都医科大学
首都医科大学附属北京天坛医院
首都医科大学附属天坛医院
出处：
中华神经外科杂志.2016,32(6):614-618.
ISSN：
1001-2346
关键词：
神经胶质瘤
CD/5-FC系统
旁观者效应
穿梭蛋白VP22
摘要：
目的 构建CD以及VP22-CD基因工程化载体,并探讨其在体外对胶质瘤细胞的杀伤作用.方法 利用聚合酶链式反应(PCR)得到CD以及VP22基因片段;利用In-fusion基因克隆方法将得到的基因片段插入到pEGFP-N1载体中,构建CD以及VP22-CD基因工程化载体;利用脂质体转染的方法将构建的基因工程化载体转染到胶质瘤细胞C6及U87细胞中,并通过体外光镜及荧光显微镜观察转染率;利用MTT比色法评价加入前药5-氟胞嘧啶后对转染后胶质瘤细胞的杀伤率.结果 (1)将CD基因或VP22-CD融合基因插入到pEGFP-CD载体中,构建得到pEGFP-CD以及pEGFP-VP22-CD载体.(2)pEGFP-CD及pEGFP-VP22-CD载体可转染入C6或U87胶质瘤细胞,转染率分别为2.5％和3.7％以及2.0％和4.1％.(3)在C6或U87细胞中转染pEGFP-CD或pEGFP-VP22-CD载体并加入前药5-氟胞嘧啶后,细胞的存活率分别为(30.36±0.63)％和(11.75±1.01)％以及(28.78±3.62)％和(18.26±2.27)％,与转染pEGFP-N1组相比差异均有统计学意义(均P＜0.05).(4)在C6或U87细胞中加入前药5-氟胞嘧啶后,转染pEGFP-VP22-CD组与转染pEGFP-CD组相比差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 CD/5-FC系统在体外对恶性胶质瘤细胞具有显著的杀伤作用和旁观者效应;并且穿梭蛋白VP22可进一步促进系统对细胞的杀伤作用.
基金：
国家自然科学基金(81302186,81372354)%北京市神经外科研究所创新基金(所青年-2014-003)%北京市自然科学基金(7151002)%北京市医院管理局青年人才培养“青苗”计划(QML20150505)National Natural Science Foundation of China(81302186,81372354)%Natural Science Foundation of Beijing Neurosurgical Institute(2014-003)%Beijing Natural Science Foundation(7151002)%Beijing Municipal Administration of Hospitals' Youth Programme(QML20150505)
第一作者：
米蕊芳
第一作者机构：
[1]北京市神经外科研究所首都医科大学100050
推荐引用方式(GB/T 7714)：
米蕊芳,金贵善,张俊文,等.VP22-CD基因工程化载体对胶质瘤细胞体外杀伤作用的研究[J].中华神经外科杂志.2016,32(6):614-618.
