资源类型：
期刊
收录情况：
◇ 统计源期刊
文章类型：
论著
机构：
[1]首都医科大学医学实验与测试中心北京100069
首都医科大学
[2]济宁医学院药学院2013年级药物制剂技术日照276826
济宁医学院
[3]首都医科大学附属友谊医院妇产科北京100050
首都医科大学
[4]首都医科大学附属北京天坛医院急诊科北京100050
诊疗科室
急诊科
首都医科大学
首都医科大学附属北京天坛医院
首都医科大学附属天坛医院
出处：
微生物与感染.2015,(5):308-314.
ISSN：
1673-6184
关键词：
聚合酶链反应-高分辨率熔解曲线技术
微生物菌群
16S rDNA文库
慢性阻塞性肺病
哮喘
摘要：
为探讨聚合酶链反应‐高分辨率熔解曲线（PCR‐HRM）技术在检测呼吸道菌群中的应用，本研究用支气管镜从慢性阻塞性肺病患者下呼吸道采集分泌液，提取细菌总DNA ，以16S通用引物27F／1492R扩增16S rDNA全长，PCR产物经电泳、纯化后连接到pGEMT‐Easy载体上，构建16S rDNA克隆文库。然后以16S rDNA V3区通用引物338F／518R扩增克隆文库，V3区PCR‐HRM分析在罗氏LightCycler 480实时荧光定量PCR系统中进行，采用HRM基因扫描软件分析数据。根据不同 HRM图型，挑选克隆株测序并鉴定菌株。结果显示，PCR‐HRM技术可灵敏区分下呼吸道不同细菌16S rDNA V3区，根据 HRM图谱可极大减少克隆菌株测序样本，提示PCR‐HRM技术可作为一种快速、高通量、敏感、经济的菌群多样性检测方法。
基金：
国家自然科学基金(30901598)%首都医科大学基础临床科研合作基金(13JL28、14JL29)%首都医科大学校基金技术类项目(2014JS08)
第一作者：
赵焕英
第一作者机构：
[1]首都医科大学医学实验与测试中心北京100069
[3]首都医科大学附属友谊医院妇产科北京100050
[4]首都医科大学附属北京天坛医院急诊科北京100050
推荐引用方式(GB/T 7714)：
赵焕英,薛冰,方霄,等.聚合酶链反应-高分辨率熔解曲线技术在下呼吸道细菌鉴定中的应用[J].微生物与感染.2015,(5):308-314.
