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噬菌体展示筛选人源细胞黏附分子L1结构域抗体及其体外实验研究

Screening of the domain antibody targeting cell adhesion molecule L1 through phage display and its in vitro effects

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C

机构: [1]汕头大学医学院神经科学中心广东汕头515041 [2]首都医科大学北京市神经外科研究所北京100050
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ISSN:

关键词: 噬菌体展示 结构域抗体 细胞黏附分子L1 神经损伤 SK-N-SH细胞系 信号通路

摘要:
目的 使用噬菌体展示技术筛选人源细胞黏附分子L1结构域抗体并体外观察其对神经来源细胞信号通路及细胞聚集的影响.方法 以L1纤黏连蛋白FN2-3区肽段为抗原,利用噬菌体抗体库(DAb library)筛选并纯化相应人源结构域抗体,并通过酶联免疫吸附法(ELISA)及免疫荧光观察抗体与抗原结合特性.给予神经来源SK-N-SH细胞抗体,使用蛋白质印迹(Western blot)观察24 h时其对L1下游信号通路Erk及Akt1激活的影响.使用结晶紫进行细胞染色观察抗体对细胞聚集的影响.结果 成功筛选出与L1FN2-3区肽段结合的结构域抗体H2-1,与SK-N-SH细胞内源性L1结合良好.与溶剂对照组相比,该抗体可有效促进SK-N-SH细胞中L1下游信号分子Erk1/2及Akt1磷酸化激活(分别为P<0.01和P<0.05),并可促进神经突生长及神经细胞聚集.结论 L1激动型结构域抗体可激活L1相关信号分子,促进神经突生长等作用,具有进一步实验治疗脊髓损伤等神经系统创伤性疾病的研究价值.

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第一作者:
第一作者机构: [1]汕头大学医学院神经科学中心广东汕头515041
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