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shRNA干扰技术在脑胶质瘤细胞TGFβ2/Smads通路中的作用

shRNA interference on TGF-β2/Smads signal pathway in human glioma cell

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-C ◇ 中华系列

机构: [1]首都医科大学附属北京天坛医院神经外科首都医科大学北京市神经外科研究所100050
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关键词: RNA干扰 神经胶质瘤 转化生长因子β2 基因

摘要:
目的 利用shRNA干扰技术抑制恶性脑胶质瘤细胞TGFβ2/Smads通路中Smad2/3基因的表达,探讨其在恶性胶质瘤细胞增殖中的作用.方法 将表达Smad2/3 shRNA干扰序列的特异性质粒及阴性对照质粒用脂质体转染法,分别转入到恶性脑胶质瘤细胞U251中.应用Real-TimePCR和Western blot法分别检测细胞中Smad2/3基因mRNA和蛋白的表达;转染后的细胞经TGFβ2(+/-)处理,采用CCK-8法评价两组的增殖率.结果 (1)两种特异性质粒能够分别下调细胞中Smad2/3基因的表达(P=0.01);(2)Smad2/3的表达量在Smad3/2表达下调组中明显高于对照组(P =0.018,P=0.008);(3)Smad2/3表达下调组的细胞增值率明显高于对照组(P=0.001);(4)Smad3表达下调的细胞,在TGFβ2(+/-)处理的两组中增殖率差异无统计学意义(P=0.258).结论 在恶性胶质瘤细胞U251中,Smad2/3基因表达的下调能促进细胞的增殖,而TGFβ2介导的细胞增殖依赖于TGFβ2/Smad3通路;同时Smad2/3基因的表达下调增强了Smad3/2基因的表达.

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第一作者:
第一作者机构: [1]首都医科大学附属北京天坛医院神经外科首都医科大学北京市神经外科研究所100050
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