摘要:
目的 探讨多药耐药基因短发卡RNA (MDR1 shRNA)与壳聚糖氧化铁(Fe3O4)纳米颗粒对胶质瘤细胞系转染的影响.方法 设计并合成针对MDR1的shRNA序列与pSIREN-Re仃oQ质粒载体连接,提取质粒,制备壳聚糖纳米颗粒并包裹制备的质粒,测定包封率及粒径分布.培养人类胶质母细胞瘤BT325共转染,测定转染效率.结果 质粒pSIREN-RetroQ-RNAi经双酶切后测序验证,与实验设计的shRNA长度相符.壳聚糖一铁纳米粒子的粒径为100~300 nm,分布较均匀,包裹质粒DNA包封率为97%~99%.壳聚糖Fe3O4纳米粒子包裹质粒经PI试剂转染BT325细胞,在共转染24 h开始表达,荧光显微镜下呈绿色荧光,48 h表达最强.转染效率为70%~80% (P <0.05).结论 MDR1 shRNA表达质粒与壳聚糖Fe3O4纳米粒子结合,可提高胶质瘤细胞系BT325转染效率,转染后细胞可以正常生长,可以为进一步的靶向基因检测及治疗提供有意义的思路.