摘要：
目的 观察重组人红细胞生成素(recombinant human epo,rHuEPO)对戊四氮(pentylenetetrazol,PTZ)点燃的癫痫持续状态(status epilepticus,SE)的SD大鼠海马神经元凋亡的影响,应用PI3K (phosphatidyl inositol 3 kinase磷脂酰肌醇3激酶)抑制剂LY294002进一步探讨rHuEPO作用的可能机制.方法 采用PTZ点燃大鼠SE模型,将大鼠随机分为A组:正常对照组(生理盐水normal saline NS)、B组:PTZ组(PTZ+NS)、C组:rHuEPO组(PTZ +rHuEPO)、D组:LY294002组(PTZ+LY294002+rHuEPO)、E组:LY294002溶剂DMSO(二甲基亚砜)对照组(PTZ+DMSO+rHuEPO), 检测大鼠行为学和脑电图的改变及HE染色观察海马病理学的改变;用TUNEL方法检测海马神经细胞的凋亡情况;免疫组织化学法观察磷酸化蛋白激酶B、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)、X-连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的表达.结果 在PTZ点燃大鼠SE后rHuPO活化了磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B途径,激活了半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9、X-连锁凋亡抑制蛋白的表达;rHuEPO可以调控它们的表达,减少海马神经元的坏死、凋亡,发挥神经保护作用; 加入PI3K抑制剂LY294002,海马磷酸化蛋白激酶B表达较rHuEPO组减少,与rHuEPO组比较Caspase-9表达增多,XIAP表达减少,减弱了rHuEPO的保护作用.结论 PI3K/Akt信号通路是rHuEPO发挥神经保护作用的通路之一,其作用机制可能是rHuEPO活化PI3K/Akt后,对线粒体凋亡途径的相关调控因子Caspase-9、XIAP的表达进行了调控,进而介导线粒体凋亡途经,发挥抗凋亡、促存活的神经保护作用.
